Serum Alkalen Fosfataz ve Asit Fosfataz Enzimlerinin Aktivileri Üzerine Lizinoprilin İn Vitro Etkisi / The in vitro effect of lisonopril on serum alkaline phosphatase and acid phosphatase enzymes activity

Year 2017, Volume: 13 Issue: 1, 233 - 237, 30.03.2017

Safinur Yıldırım Çelik , Nazan Demir Yaşar Demir

https://doi.org/10.18466/cbayarfbe.302653

Cited By: 1

Abstract

Hipertansiyon, çoğu yaşlı insanın
mustarip olduğu bir hastalıktır. Yüksek tansiyonu olan insanlar genellikle
hayatları boyunca sağlıklı bir yaşam sürdürebilmek için kan basıncını düşüren
ilaçları kullanmak zorundadırlar. Bu çalışmada, lisiniprol adlı hipertansiyon
ilacının kemik yapım ve yıkımının bir göstergesi olan alkalen fosfataz (ALP) ve
tartarata dayanıklı asit fosfataz (TrACP) enzimlerinin aktiviteleri üzerine
olan etkilerini in vitro olarak incelenmiştir. İnsan serumundan alkalen
fosfataz enzimi DEAE-selüloz, asit fosfataz enzimi ise CM-selüloz iyon değişim
kromatografisi kullanılarak saflaştırılmıştır. Alkalen ve asit fosfataz
enzimlerinin aktiviteleri substrat olarak p-nitrofenilfosfat kullanılarak
belirlenmiştir. TrACP enzim aktivitesi bulunurken ortama tartarat ilave
edilerek TrACP dışındaki diğer asit fosfataz enzimlerinin inhibe olması
sağlanmıştır. Alkalen fosfataz ve tartarata dayanıklı asit fosfataz enzimlerinin
aktiviteleri substratın (0,033, 0,1, 0,16, 0,23 ve 0,3 mM) beş farklı konsantrasyonunda
inhibitörlü ve inhibitörsüz ortamlarda bulunmuştur. İnhibitörün ise her bir
substrat konsantrasyonu için 10^-2, 10^-3 ve 10^-4
M olmak üzere üç farklı derişimi kullanılmıştır. İlacın her iki enzimi de
inhibe ettiği tespit edilip, I₅₀ değerleri 0,17 mM  ve 0,79 mM olarak hesaplanmıştır. Ayrıca K_i
değerleri Lineweaver-Burk grafiğinden yararlanılarak ALP ve TrACP için
sırasıyla 6,98x10^-4, 7,06x10^-4 olarak
hesaplanmıştır.

Hypertension is a disease that most elderly people suffer.
People with high blood pressure often obliged to use the drug that lowers blood
pressure in order to maintain a healthy lifestyle throughout their lives. In
this study, the in vitro effect of lisonopril on serum alkaline phosphatase and
acid phosphatase enzymes which are essential for normal bone formation and
mineralization activities was
investigated. Alkaline phosphatase enzyme was purified using DEAE-cellulose,
acid phosphatase enzyme was purified using CM-cellulose ion exchange
chromatography from human serum. The activities of alkaline and acid
phosphatase were determined using p-nitrophenylphosphate as the substrate. When
finding out the activity of TrACP enzyme, adding tartrate to the environment
provided inhibition of other acid phosphatase enzymes than TrACP. The
activities of alkaline phosphatase and acid phosphatase, which is resistant to
tartrate, have been found at five different concentrations of substrates
(0.033, 0.1, 0.16, 0.23 and 0.3 mm) in environment with inhibitor and without
inhibitor. While three different concentrations of the inhibitor, including 10^-2,
10^-3 and 10^-4, was used for each substrate
concentration. It was found that the drug inhibit both enzymes, and I₅₀
value was calculated as 0.17 mm and 0.79 mm. Furthermore, Ki values ​​were
calculated as 6.98x10^-4, 7.06x10^-4 for ALP
and TrACP respectively by utilizing
the Lineweaver-Burk plot. 

Keywords

Alkalen fosfataz, Asit fosfataz, Lizinopril, Alkaline phosphatase, acid phosphatase, lisonopril

References

• [11] Nakanishi, M.; Yoh, K.; Miura T.; Ohası, T.; Rai, S.K.; Uchida, K. Development of a kinetic assay for band 5b tartrate-resistant acid phosphatase activity in serum. Clin. Chim. 2000, 46, 469-473.