MTUS1 TÜMÖR BASKILAYICI GEN VE ONUN ANA TRANSKRİPT VARYANTI ATIP3A’NIN U2OS VE MCF- 7 HÜCRELERİNDE PAKLİTAKSEL KAYNAKLI NEGATİF REGÜLASYONU Paclitaxel-induced Negative Regulation of MTUS1 Tumor Suppressor Gene and its Major Transcript Variant ATIP3a in U2OS and MCF-7 Cells

Yıl 2018, Cilt: 8 Sayı: 3, 65 - 70, 16.09.2018

Önder Yumrutas

Öz

Artan kanıtlar, MTUS1’in meme, yumurtalık, pankreas, kolon kanseri gibi çeşitli malignitelerde

düşük seviyelerde eksprese edildiğini göstermiştir. Ayrıca, fonksiyonel çalışmalar, ATIP1 ve

ATIP3a/b’nin, tümör baskılayıcı aktivitelere sahip olan MTUS1’in iki büyük splice varyantı olduğunu

göstermektedir. ATIP3’ün bir mikrotübül ilişkili protein bölgesine sahip olduğu, mikrotübüllerle

birlikte lokalize olduğu ve mikrotübül dinamiğinin düzenlenmesinde rol alarak uzamış

mitoza yol açtığı rapor edilmiştir. Buna ek olarak, paklitaksel, çeşitli kanser tiplerinde güçlü

etki gösteren ve mikrotübüllerin oluşumunu indükleyen ve bozulmasını engelleyen güçlü bir

antineoplastik ajantır. Dolayısıyla, bu çalışmada tümör baskılayıcı MTUS1 ve MTUS1’in majör

transkript varyantı olan ATIP3’ün paklitaksel ile indüklenmiş mikrotübül stabilizasyonu ve hücre

ölümündeki rolününün araştırılması amaçlanmıştır. Paklitakselin aktif dozunu saptamak için,

MCF-7 ve U2OS hücrelerinin hücre canlılığı, MTT hücre canlılığı testi kullanılarak belirlenmiştir.

Ayrıca, toplam MTUS1 mRNA ve ATIP3 mRNA’nın gen ekspresyonundaki değişiklikler, real-time

PCR metodolojisi kullanılarak belirlenmiştir. Sonuç olarak, MTUS1 ve ATIP3 ekspresyonun, MCF-

7 hücrelerinde paklitaksel uygulaması sonrasında azaldığı tespit edilmiştir. MTUS1’in ekspresyon

seviyeleri U2OS hücrelerinde de azalmıştır, ancak ATIP3’ün seviyesi artmıştır. Ancak, bu değişiklikler

istatistiksel olarak önemsiz bulunmuştur. Sonuç olarak, paklitaksel U2OS ve MCF-7 kanser

hücrelerinde MTUS1 tümör baskılayıcı geni ve MTUS1’in majör transkript varyantı olan ATIP3’ü

negatif yönde düzenlemektedir. Bu sonuçlar MTUS1 ve protein ürünü olan ATIP3’ün mikrotübül

dinamiğinin düzenlenmesinde rol oynayabileceğini göstermiştir.

Anahtar kelimeler: ATIP; Cancer; İkili fonksiyon; MTUS1; MTSG1; Tümor Supresör

ABSTRACT

Accumulating evidence proposes that MTUS1 was expressed at low levels in a variety of

malignancies such as breast, ovarian, pancreas, colon cancers. Also, functional studies indicate

that ATIP1 and ATIP3a/b are the two major splice variants of MTUS1 which possess tumor

suppressor activities. ATIP3 was shown to bear a microtubule-associated domain and is localized

in association with microtubules and interfere with the microtubule dynamics and leads to

prolonged mitosis. In addition, paclitaxel is a talented antineoplastic agent which shows potent

activity on various types of cancers and induces the assembly of microtubules and inhibits their

disassembly. Accordingly, in this study, we aimed to examine the key role of tumor suppressor

MTUS1 and its major transcript variant ATIP3 in paclitaxel-induced microtubule stabilization and

cell death. To determine active dose of paclitaxel, cell viability of MCF-7 and U2OS cells was

determined by using MTT cell viability assay. Also, gene expression changes of total MTUS1 and

ATIP3 mRNAs were determined by using real-time PCR methodology. As a result, the expression

of MTUS1 and ATIP3 was lowered in response to paclitaxel in MCF-7 cells. Expression levels

of MTUS1 were also reduced in U2OS cells but ATIP3 was increased. However, these changes

were statistically insignificant. In conclusion, paclitaxel is inducing negative regulation of MTUS1

tumor suppressor gene and its major transcript variant ATIP3a in U2OS and MCF-7 cells and they

might be involved in the regulation of microtubule dynamics

Key words: ATIP; Cancer; Dual functions; MTUS1; MTSG1; Tumor Suppressor

Anahtar Kelimeler

MTUS1 TÜMÖR BASKILAYICI GEN VE ONUN ANA TRANSKRİPT VARYANTI ATIP3A’NIN U2OS VE MCF- 7 HÜCRELERİNDE PAKLİTAKSEL KAYNAKLI NEGATİF REGÜLASYONU Paclitaxel-induced Negative Regulation of MTUS1 Tumor Suppressor Gene and its Major Transcript Variant ATIP3a in U2OS and MCF-7 Cells

Kaynakça

• Önder YUMRUTAS [e-mail]; [e-mail]